【摘 要】
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目的探讨miR-199a-5p在常氧及低氧环境下的大鼠气道平滑肌细胞(ASMC)中的表达以及miR-199a-5p对ASMC增殖的调控和低氧诱导因子1α(HIF-1α)表达的影响。方法用贴壁法体外培养
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目的探讨miR-199a-5p在常氧及低氧环境下的大鼠气道平滑肌细胞(ASMC)中的表达以及miR-199a-5p对ASMC增殖的调控和低氧诱导因子1α(HIF-1α)表达的影响。方法用贴壁法体外培养大鼠ASMC,在常氧及低氧条件下培养24 h,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测ASMC中miR-199a-5p含量;人工合成大鼠miR-199a-5p的拟似物和抑制物,用脂质体转入低氧培养的ASMC,qRT-PCR检测miR-199a-5p及HIF-1αmRNA的表达,Western blot法检测HIF-1α蛋白的表达,CCK-8法检测ASMC的增殖情况。结果与常氧组相比,低氧处理促进细胞增殖,低氧组HIF-1αmRNA及HIF-1α蛋白的相对水平显著升高;低氧组miR-199a-5p的量较常氧组减少;转染miR-199a-5p拟似物可以显著减缓低氧条件下ASMC的增殖,而其抑制物可促进低氧条件下的细胞增殖。拟似物组HIF-1α蛋白较对照组降低,抑制物组则升高,而低氧条件下各组HIF-1αmRNA水平无明显差异。结论 miR-199a-5p能抑制低氧条件下ASMC的增殖和HIF-1α蛋白的表达。
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