玉米叶片蛋白质双向电泳方法的优化

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为了建立适合玉米叶片蛋白质组研究的双向电泳方法,以玉米自交系齐319为实验材料,采用3种不同的蛋白提取方法提取玉米叶片蛋白质,进行单向SDS.PAGE和双向电泳,并进行硝酸银染色。结果表明,TCA/丙酮沉淀法适合玉米叶片蛋白质的提取。建立了适合玉米叶片蛋白的双向电泳体系,即采用24cm、pH4.7的IPG胶条,蛋白上样量0.25mg。IEF程序为:100V1h,300V1h,500V1h,1000V2h,8000V3h,8000V10h。SDS-PAGE的电泳条件为1w/胶条1h,3w/胶条,直到溴酚蓝到
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