【摘 要】
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目的 探讨骨碎补总黄酮对骨髓间充质干细胞(BMSC)成骨分化过程中,对Wnt/β-catenin信号通路相关因子mRNA表达的影响.方法 采用全骨髓贴壁法分离、培养SD大鼠BMSC,取3代细胞予
【机 构】
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潍坊医学院附属医院内分泌科,中山大学附属第五医院检验科,中山大学附属第五医院内分泌科
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目的 探讨骨碎补总黄酮对骨髓间充质干细胞(BMSC)成骨分化过程中,对Wnt/β-catenin信号通路相关因子mRNA表达的影响.方法 采用全骨髓贴壁法分离、培养SD大鼠BMSC,取3代细胞予100μg/ml浓度骨碎补总黄酮进行干预,21 d后,观察并行矿化结节染色,在干预7、14、21、28 d时检测成骨分化标志物碱性磷酸酶(ALP)活性和Wnt/β-catenin信号通路相关因子β-catenin、淋巴增强因子1(LEF-1)、细胞周期蛋白D(cycline D) mRNA的表达情况.结果 干预后各个时间点骨碎补总黄酮组ALP活性(U/L)均较空白组高(7 d:11.10±0.08比1.61±0.14；14 d:24.62±0.34比1.64±0.04;21 d:18.4 ±0.06比1.53 ±0.04；28 d:14.91 ±0.14比1.52 ±0.04;均P ＜0.01)；21 d后行矿化结节染色,骨碎补总黄酮组为阳性,空白组为阴性；干预后β-catenin mRNA在第14天表达最高(0.357±0.062比0.174 ±0.013,P＜0.05)；LEF-1、cyclineD mRNA在第7大表达最高(LEF-1:0.0611 ±0.0002比0.0345±0.0131；cycline D:0.1510±0.0255比0.0718±0.0294均P＜0.05).结论 骨碎补总黄酮诱导大鼠BMSC向成骨细胞分化,伴随Wnt/β-catenin信号通路相关因子mRNA表达的变化.
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