【摘 要】
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目的探讨单细胞PCR用于妊娠前HLA诊断分型。方法分别采用碱、蛋白酶和冻融裂解法制备单细胞DNA模板,然后采用多重PCR分别扩增HLA-A,HLA-B基因的第2、3外显子和第2内含子区域,HLA
【机 构】
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山东省千佛山医院检验科,山东大学第二医院检验科,山东省高新技术投资有限公司生物项目组
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目的探讨单细胞PCR用于妊娠前HLA诊断分型。方法分别采用碱、蛋白酶和冻融裂解法制备单细胞DNA模板,然后采用多重PCR分别扩增HLA-A,HLA-B基因的第2、3外显子和第2内含子区域,HLA-DrB1基因的第2外显子区域。结果酶裂解法可有效制备单细胞DNA模板,单细胞DNA扩增成功率95%,所设计引物可有效扩增HLA-A、B和DrB1序列,全部操作可在6h内完成。结论本研究建立的巢式多重PCR技术对单细胞HLA分型具有较高的扩增效率,操作时间短,可望应用于临床妊娠前诊断。
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