去唾液酸糖蛋白受体H1亚基CRD的原核表达、纯化及特性分析

来源 :苏州大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:peihe_8873
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目的 研究去唾液酸糖蛋白受体H1亚基糖识别区(CRD)在大肠杆菌中的诱导表达,为从噬菌体抗体库中筛选其特异性抗体提供靶分子。方法 以pET3-CRDH1为模板设计引物。通过PCR扩增CRDH1基因,采用分子克隆技术将其定向克隆至原核表达载体pET-32c中。将含CRDH1/pET-32c的BL21单菌落接种至LB肉汤培养基中培养,并通过IPTG诱导表达。表达产物经Ni^2+螯合柱亲和纯化,采用免疫印迹技术(WB)分析融合蛋白的免疫反应性。结果表达产物经SDS-PAGE在35kd左右显示条带,符合CRDH1
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