高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒N基因真核表达载体的构建及表达

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为进一步研究高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)N 蛋白的结构、功能及免疫学特性,提取 PRRSV 云南分离株 A06 RNA,设计特异性引物扩增全长 N 基因,得到长度为372 bp 的目的片段,克隆至杆状病毒 Bac-To-Bac 表达载体 pFastBac HTB 中,转化大肠埃希菌 DH10Bac 进行同源重组,成功构建了含有 N 基因的真核表达载体,转染 Sf9细胞,回收得到重组杆状病毒。SDS-PAGE 和 Western blot 检测结果表明,表达产物17 ku,与预期大小一致,能与 PRRSV 阳性血清产生特异性反应。
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