【摘 要】
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目的探讨Aurora-B介导NPM1（nucleophosmin1）蛋白磷酸化水平改变对骨肉瘤细胞恶性表型的影响。方法运用生物信息学数据库预测NPM1在肉瘤中的表达情况以及Aurora-B与NPM1的相互关
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(81560435);江西省杰出青年人才资助项目(20162BCB23057);江西省自然科学基金资助项目(20161ACB20011)
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目的探讨Aurora-B介导NPM1（nucleophosmin1）蛋白磷酸化水平改变对骨肉瘤细胞恶性表型的影响。方法运用生物信息学数据库预测NPM1在肉瘤中的表达情况以及Aurora-B与NPM1的相互关系。构建重组慢病毒载体,获得沉默Aurora-B慢病毒（LV/ShAurora-B）、过表达NPM1慢病毒（LV/NPM1）和阴性对照慢病毒（LV/negative）。转染人源骨肉瘤细胞系143B及U2-OS细胞,分为Lv/ShAurora-B组、NC（LV/negative）组和LV/ShAurora-B+LV/NPM1共转染组。Western blot分别检测LV/ShAurora-B组和NC组中Aurora-B、磷酸化NPM1ser125蛋白表达。采用CCK-8法检测3组细胞增殖情况,Wound healing法检测细胞迁移能力,Transwell invasion法检测细胞侵袭能力。结果生物信息学结果显示,NPM1在肉瘤中高表达以及NPM1高表达患者的预后较差,且NPM1存在丝氨酸和苏氨酸磷酸化位点,Aurora-B与NPM1之间可能存在磷酸化作用。Western blot结果显示,与NC组相比,LV/ShAurora-B组中Aurora-B和磷酸化NPM1ser125蛋白的表达均降低（P<0.05）,而NPM1蛋白差异无统计学意义（P>0.05）。体外表型实验显示,LV/ShAurora-B组细胞的增殖、迁徙和侵袭能力均低于NC组（P<0.05）,且LV/ShAurora-B+LV/NPM1共转染组能部分恢复下调Aurora-B对骨肉瘤细胞恶性表型的抑制（P<0.05）。结论 Aurora-B通过介导NPM1蛋白磷酸化促进骨肉瘤细胞恶性表型。
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