【摘 要】
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为进一步提高猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)间接ELISA诊断试剂稳定性,以纯化的PCV2重组Cap蛋白0.625mg/L包被酶标板,通过经验法和方阵法将甘油、蔗糖、PEG4
【机 构】
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山东省滨州畜牧兽医研究院; 山东绿都生物科技有限公司;
【基金项目】
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山东省自然科学基金资助项目(2010ZRA16005)
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为进一步提高猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)间接ELISA诊断试剂稳定性,以纯化的PCV2重组Cap蛋白0.625mg/L包被酶标板,通过经验法和方阵法将甘油、蔗糖、PEG4000、海藻糖、明胶、EDTA等组成不同配比的抗原包被、酶结合物和标准对照品稳定剂,通过在4℃和37℃条件下试剂盒的稳定性试验,使用4P拟合曲线等分析其效果,以期筛选出最佳稳定剂配组。结果显示,1%蔗糖、20%甘油、0.000 5%MgCl2和1%蔗糖、0.2%BSA、1.0%海藻糖、0.1%PEG4000、0.02mol/L PMSF及0.1%明胶、0.1%EDTA、1%海藻糖、8%甘油、1.3%氯化钠分别为最佳抗原包被、酶标抗体和标准对照品的稳定剂。使用该稳定剂组装的PCV2ELISA试剂盒放置在4℃条件下8个月和37℃条件下8d,其D450值4P数据分析R2值均在0.99以上,说明配制的试剂盒稳定剂对ELISA试剂具有良好的保护作用,在4℃条件下有效期可达8个月。
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