分析结核分枝杆菌潜伏感染(LTBI)和肺结核患者外周血CD14^＋单核细胞微RNA(miRNA)表达谱的差异。

选择深圳市宝安区慢性病防治院和深圳市第三人民医院2013年6月至2014年2月收治的肺结核患者31例，同时选择上述医院体检科的LTBI者31例。从肺结核和LTBI人群中各挑选6例(男、女各3例)进行miRNA芯片检测，筛选出差异表达的miRNA。选取具有代表性的差异表达的miRNA，采用TaqMan qPCR检测验证其在两组人群(各25例)中表达的差异。应用受试者工作特征(ROC)曲线评价差异表达的miRNA诊断肺结核的价值。应用miRFocus靶基因预测集成数据库对差异表达的miRNA进行靶基因预测，并对预测的靶基因进行GO和KEGG通路分析。

与LTBI人群相比，肺结核患者CD14^＋单核细胞中表达上调2倍以上的miRNA有4个，表达下调2倍以上的miRNA有36个。对差异表达的miRNA进行聚类分析发现，差异表达的40个miRNA分子可分为2个基因簇。从2个基因簇中各选取一个具有代表性的miRNA分子(miR–378和miR–483–5p)进行TaqMan qPCR验证。结果显示，miR–378在肺结核患者中的表达水平为4.17±0.25，显著高于其在LTBI人群中的表达水平(2.31±0.24，t＝5.25，P<0.01)；miR–483–5p在肺结核患者中的表达水平为1.71±0.16，显著低于其在LTBI人群中的表达水平(2.97±0.15，t＝5.45，P<0.01)。ROC曲线分析显示，miR–378诊断肺结核的敏感性为0.76，特异性为0.72；miR–483–5p诊断肺结核的敏感性为0.84，特异性为0.76。生物信息学分析显示miR–378和miR–483–5p的靶基因主要参与细胞增殖、凋亡、抗原提呈、信号转导等过程。

LTBI和肺结核人群外周血CD14^＋单核细胞miRNA表达谱存在显著差异，其中miR–378和miR–483–5p可以作为有效分子标识鉴别诊断两组人群。