【摘 要】
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目的 克隆和构建带人骨桥蛋白（OPN）启动子区基因的载体pGL3-OPN.方法 一步法提取人脐静脉内皮细胞（HUVEC）总DNA,PCR扩增 OPN全长基因,克隆入T载体,测序,双酶切连入真核表达载体pG
【基金项目】
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国家自然科学基金（81102853）
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目的 克隆和构建带人骨桥蛋白（OPN）启动子区基因的载体pGL3-OPN.方法 一步法提取人脐静脉内皮细胞（HUVEC）总DNA,PCR扩增 OPN全长基因,克隆入T载体,测序,双酶切连入真核表达载体pGL3-vector,酶切鉴定.将构建好的pGL3-OPN瞬时转染到人乳腺癌细胞MDA-MB-435中,利用双荧光素酶报告基因检测试剂盒进行检测,通过计算两种质粒荧光素酶活性的比值来筛选药物.结果 扩增出人OPN基因全长,测序结果和GenBank记载一致,成功克隆入真核表达载体.p47可一定程度激活OPN启
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