【摘 要】
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目的 探讨Nested-PCR在布鲁氏菌病(布病)患者早期快速诊断中的可行性.方法 用Nested-PCR对布鲁氏菌标准菌株的19生物型、4个疫苗株(M5、A19、S2和104M)和有血清交叉反应的菌
【机 构】
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内蒙古自治区综合疾病预防控制中心,呼和浩特010031;中国疾病预防控制中心传染病预防控制所,传染病预防控制国家重点实验室,北京 102206;乌兰察布市地方病防治中心,集宁012000
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目的 探讨Nested-PCR在布鲁氏菌病(布病)患者早期快速诊断中的可行性.方法 用Nested-PCR对布鲁氏菌标准菌株的19生物型、4个疫苗株(M5、A19、S2和104M)和有血清交叉反应的菌株(人苍白杆菌、大肠杆菌O∶157、小肠结肠炎耶尔森氏菌O∶9)进行扩增,评价该方法的特异性;用Nested-PCR对倍比稀释的16M菌株DNA(100～10-7)进行扩增,评价该方法的分析敏感性.用Nested-PCR对临床采集的200份布病样本DNA进行检测,评价该方法在临床样本检测中的可行性.结果 Nested-PCR能特异性的检出所有布鲁氏菌种,而与布鲁氏菌有血清学交叉反应的菌株和阴性对照未见扩增.试验表明该方法的分析敏感性至少为10-6(相当于43 fg/μL羊种布鲁氏菌DNA),明显高于BCSP31-PCR.该方法首轮引物的扩增阳性率为4.5％ (9/200),次轮引物扩增的阳性率为75.5％ (151/200),与血清学检测结果有较高的一致性.结论 Nested-PCR可尝试用于布病患者的早期筛查,但尚需优化改进.
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