共培养环境中兔角膜内皮细胞诱导人iPSCs分化

来源 :中国病理生理杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cj258399542
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:观察人诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs)与兔角膜内皮细胞(cornealendothelial cells,CECs)共培养前后的形态学变化,检测iPSCs向CECs分化前后部分标志蛋白表达的变化,为研究iPSCs向CECs的分化提供实验依据。方法:分离培养兔CECs并传代,同时使用无饲养层细胞法培养扩增人脐带源iPSCs,Western blotting对其进行鉴定;用量子点对iPSCs进行标记示踪,以不同密度比例建立iPSCs与CECs的共培养模式,用原子力显微镜(atomic force microscopy,AFM)结合倒置显微镜观察共培养前后iPSCs的形态学变化,免疫荧光法检测iPSCs分化前后CD34、CD133、CD31和水通道蛋白1(AQP1)蛋白表达的变化。结果:培养扩增的兔CECs形态为六边形,呈典型的铺路石样外观;iPSCs呈克隆样生长,Western blotting检测Oct4、Nanog和Sox2多能性标志蛋白均呈阳性;10 nmol/L量子点标记的iPSCs以1/4悬液与融合60%的兔CECs共培养为最佳模式;AFM结合倒置显微镜观察到共培养后iPSCs体积增大,胞浆增多,核浆比减小,细胞膜表面可见颗粒状突起物,膜表面粗糙度增加;免疫荧光法检测分化前iPSCs的CD34、CD133、CD31和AQP1表达均呈阴性,共培养2周后iPSCs的CD34、CD133和CD31表达阴性,AQP1表达阳性。结论:与兔CECs混合共培养后人iPSCs不仅从形态学上向内皮样细胞方向转化,同时表达角膜内皮细胞标志蛋白AQP1。
其他文献
企业的顾客是其生存和发展的基础。所以,企业与顾客的关系管理具有重大的现实意义。本文首先论述了企业与顾客之间的关系应是双向、互利的沟通关系和良好顾客关系的基本特征、
背景和目的:高血压是全球重大可控性慢性疾病,已成为脑卒中、冠心病和心肾功能衰竭等的主要原因,其发病率呈逐年上升趋势。在高血压的发病机制中,环境因素所起的作用约占60%
进入新世纪以来,我国在教育方面取得的成就是有目共睹的,同时我国教育整体呈现出多元化的发展趋势,其中小学美术教学作为我国小学素质教育的重要组成部分,在很大程度上促进了
随着新一轮政治周期的开启,地方政府性债务风险问题受到了前所未有的关注,不但被载入中央和各省市的《政府工作报告》,也成为中共中央《关于全面深化改革若干重大问题的决定
生态高层住宅建筑逐渐在国内得到了广泛的关注,而且在绿色建筑思想的推动下,可持续发展和能源保护必然会深入到住宅建筑设计当中。本文立足于从建筑技术结合设计角度研究湿热
我国上市公司关联方交易存在不少问题,原因在于上市公司的股权结构过于集中,法人治理结构有缺陷,有关法律法规不完善,利润操纵现象明显,关联交易的披露不完善。因此,应进一步
学生心目中的"重要他人"主要是教师和家长,因此教师的评价十分关键。善用评价手段来激励学生,可增加师生双方感情投资,有助于提高教学质量。本文主要从教师评价、同伴评价以
汽车乘坐动力学(vehicle ridedynamics)是汽车动力学的一个分支,建立乘坐动力学数学模型,通过计算机仿真研究其性能是常用方法之一。 汽车乘坐动力学数学模型有线性和非线性两
山东省经济增长较快但金融整体发展水平较低,金融人才在金融业发展过程中起着重要作用,为保证经济可持续发展,必须深入研究金融人才战略。山东省金融人才现状是人才短缺,分布
<正>2月11日举行的诺曼底四方明斯克峰会持续了近17个小时,与其说带来了和平的橄榄枝,不如说创造了新的脆弱性和不确定性。第一次世界大战肇始的一个世纪后,以乌克兰危机为中