【摘 要】
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目的 探讨HBsAg重组腺病毒Ad-S转染的小鼠树突状细胞(DC)诱导HBV转基因(Tg)小鼠免疫应答的作用特点及其可能的治疗作用.方法 Tg小鼠的骨髓细胞体外扩增为DC,转染Ad-S或被HBs
【机 构】
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杭州师范学院基础医学部免疫学教研室
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目的 探讨HBsAg重组腺病毒Ad-S转染的小鼠树突状细胞(DC)诱导HBV转基因(Tg)小鼠免疫应答的作用特点及其可能的治疗作用.方法 Tg小鼠的骨髓细胞体外扩增为DC,转染Ad-S或被HBsAg蛋白冲击后,与pcDNA3.1(+)-S质粒分别免疫Tg鼠,用流式细胞术、乳酸脱氢酶释放法、酶联免疫分析(ELISA)、荧光定量聚合酶链反应(PCR)等分别检测脾脏T细胞内细胞因子和细胞毒性T淋巴细胞(CTL)活性、血清HBsAg、抗-HBs、HBV DNA及丙氨酸转氨酶(ALT)水平;病理和免疫组化分析肝脏组织学及HBsAg和HBcAg表达.结果 免疫后1～2周,DC/Ad-S比DC/HBsAg和pcDNA3.1(+)-S诱导Tc分泌干扰素γ(IFN-γ)和特异性CTL均显著增强,而DC/HBsAg组CTL较pcDNA3.1(+)-S组增强(P＜0.05);DC/HBsAg免疫后1、2、4周CTL迅速减弱,DC/Ad-S在1、2周CTL差异不明显,但至4周时明显减弱.免疫后1～4周,对Tg鼠血清HBsAg、HBV DNA及肝组织HBcAg和HBsAg表达的抑制作用最强为DC/Ad-S免疫,其次为DC/HBsAg,显著强于pcDNA3.1(+)-S(P＜0.05或P＜0.01).肝脏组织学、血清抗-HBs和ALT水平各组差异无统计学意义.结论 Ad-S转染的DC比HBsAg冲击的DC和DNA疫苗诱导更强的Tc1和CTL应答,能较迅速抑制HBV转基因小鼠血清HBsAg、HBV DNA和肝脏HBcAg和HBsAg表达.
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