【摘 要】
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根据GenBank中人源大肠杆菌pilA基因序列,用OLIGO6.0设计PCR引物,从鸭源致病性大肠杆菌GH1.2中扩增到pilA基因并将其克隆至pMD18-T载体,经PCR、酶切和DNA测序鉴定后,将鸭源致
【机 构】
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四川农业大学动物科技学院禽病防治研究中心,动物疫病与人类健康四川省重点实验室,双汇实业集团有限公司技术中心
【基金项目】
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国家科技攻关重大项目（No.2004BA901A03）、教育部“新世纪优秀人才支持计划”项目（No.NCET-04-0906）、四川省重大基础研究项目（No.05JY029-109）和四川省重点建设学科项目（No.SZD0418）资助.
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根据GenBank中人源大肠杆菌pilA基因序列,用OLIGO6.0设计PCR引物,从鸭源致病性大肠杆菌GH1.2中扩增到pilA基因并将其克隆至pMD18-T载体,经PCR、酶切和DNA测序鉴定后,将鸭源致病性大肠杆菌pilA基因正向插入原核表达载体pET-32a（＋）的BamHⅠ和HindⅢ位点间,成功构建了重组表达质粒pET-32a-pilA。重组表达质粒pET-32a-pilA转化表达宿主菌BL21（DE3）,用IPTG诱导,表达出了大小约为36kD的pilA重组蛋白。表达产物用镍柱亲和层析纯化,
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