p53凋亡刺激蛋白2基因肝脏条件性敲除小鼠的构建和鉴定

来源 :实用肝脏病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wenyuanyuan0929
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目的 采用Cre-LoxP系统构建p53凋亡刺激蛋白2(ASPP2)基因肝脏条件性敲除小鼠.方法 利用自行设计的sgRNA序列,在ASPP2基因两端插入LoxP序列,构建ASPP2-flox小鼠.采用PCR法和测序法对F0代和F1代小鼠进行基因型鉴定.将ASPP2-flox F1小鼠与特异性表达Alb-Cre的工具鼠交配,获得肝脏敲除ASPP2基因小鼠.采用PCR法进行基因型鉴定.采用Westernblot和免疫组化法检测ASPP2基因肝脏敲除小鼠肝脏ASPP2蛋白表达.结果 对F0代和F1代动物基因行PCR和测序结果表明,构建ASPP2-flox小鼠成功;F1代杂合子的基因型为ASPP2 fl-;将F1代杂合子与Alb-Cre小鼠进行杂交后,回交ASPP2 fl/-小鼠,其基因型为ASPP2fl/fl CreT,即为ASPP2肝脏条件性敲除小鼠;经Western blot和免疫组化法检测显示ASPP2fl/fl CreT小鼠肝脏ASPP2蛋白表达显著减少.结论 基于Cre-LoxP系统成功构建ASPP2基因肝脏条件性敲除小鼠,为后续实验作了良好的基础.
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目的 分析肌腱线抽出联合骨隧道缝合在腱性锤状指伸肌腱止点重建术中的临床疗效.方法 分析2018年8月至2020年9月西安交通大学附属红会医院收治的34例腱性锤状指患者资料,均为单指、闭合性损伤.17例行手术治疗(手术组),男10例,女7例;年龄14~50岁,平均(35.3±6.14)岁;新鲜损伤15例,陈旧性损伤2例;受伤至手术时间为1~30 d;采用肌腱线替代钢丝抽出联合骨隧道缝合进行伸肌腱止点重建,并使用克氏针固定远指间关节背伸位.17例行支具固定保守治疗(保守组),男9例,女8例;年龄21~48岁,