抗松材线虫纤维素酶单链抗体库的构建及筛选

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构建鼠源性松材线虫纤维素酶(Bursaphelenchus xylophilus cellulase,BXC)的噬菌体单链抗体库,从中筛选特异性BXC的单链抗体.以BXC为抗原免疫BALB/C小鼠,从脾脏提取总RNA,用RT-PCR技术扩增小鼠抗体重链(VH)和轻链(VL)可变区基因.经重叠PCR(SOE PCR)在体外将VH和VL连接成单链抗体(scFv)基因,并克隆到噬菌粒载体pCANTAB5E中,电转化至大肠杆菌TG1,经辅助噬菌体超感染,成功构建了库容为5×104的Anti-BXC单链抗
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