【摘 要】
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目的：克隆人N-ras蛋白全长编码区基因,获得其原核表达产物,并对融合蛋白进行纯化。方法：采用PCR技术从人乳腺文库中扩增出人N-ras蛋白全长编码区基因,将其克隆到p GEX-KG载体中
【机 构】
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军事医学科学院生物工程研究所,第二炮兵总医院,总参警卫局卫生保健处
【基金项目】
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国家自然科学基金（81472589,31100604）, 北京市自然科学基金（7132155）, 北京市科技新星计划（Z141102001814055）, 军事医学科学院创新基金转化医学项目（ZHYX003）
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目的：克隆人N-ras蛋白全长编码区基因,获得其原核表达产物,并对融合蛋白进行纯化。方法：采用PCR技术从人乳腺文库中扩增出人N-ras蛋白全长编码区基因,将其克隆到p GEX-KG载体中,在大肠杆菌Rossate中表达后,利用GST-Sepharose 4B亲和珠对原核表达产物进行纯化,SDS-PAGE鉴定表达与纯化产物。结果：从人乳腺文库中扩增获得约600 bp的DNA片段,并克隆至p GEX-KG载体上,经测序与目的序列完全一致;在大肠杆菌Rossate中诱导表达出相对分子质量约47×10
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