【摘 要】
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目的为建立布鲁氏杆菌间接ELISA检测方法。方法本研究根据GenBank中已登录猪种布鲁氏菌S2株全基因组序列,分别针对omp25和omp31设计一对引物,分别扩增并回收573 bp与783 bp目
【机 构】
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聊城职业技术学院,山东华牧天元农牧股份有限公司,山东绿都生物科技有限公司,日照市东港区动物疫病预防控制中心,山东省滨州畜牧兽医研究院
【基金项目】
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山东省高等学校科技计划项目(No.J18KB064);山东省博士后创新项目专项资金资助(No.201703056);山东省现代农业产业技术体系羊创新团队岗位专家项目(No.SDAIT-10-07)~~
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目的为建立布鲁氏杆菌间接ELISA检测方法。方法本研究根据GenBank中已登录猪种布鲁氏菌S2株全基因组序列,分别针对omp25和omp31设计一对引物,分别扩增并回收573 bp与783 bp目的基因片段,将其分别克隆入pET-28a原核表达载体中,构建重组质粒pET-OMP25与pET-OMP31,进行酶切鉴定与基因序列测定后,转化BL21表达菌,经IPTG诱导表达,OMP25与OMP31蛋白主要以包涵体形式存在;将目的蛋白纯化,应用Western blot进行蛋白活性的检测。结果纯化的目的蛋白具有
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