【摘 要】
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目的 观察阻断IgG-FcγR结合的短肽tg19320对粒细胞与内皮细胞黏附以及内皮细胞细胞问黏附分子1(ICAM-1)表达的影响,并探讨其作用机制.方法 培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC).提
【机 构】
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上海交通大学医学院附属瑞金医院肾脏科
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目的 观察阻断IgG-FcγR结合的短肽tg19320对粒细胞与内皮细胞黏附以及内皮细胞细胞问黏附分子1(ICAM-1)表达的影响,并探讨其作用机制.方法 培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC).提纯活动期血管炎患者血清抗中性粒细胞胞质抗体(ANCA)IgG.以多肽固相合成tg19320.分离健康人新鲜外周血中性粒细胞.分别以肿瘤坏死因子α(TNF-α)、健康人IgG、ANCA IgG及ANCA IgG+tg19320处理HUVEC,用细胞直接计数法检测粒细胞与内皮细胞间的黏附率;应用Western印迹及实时定量PCR方法检测HUVEC ICAM-1蛋白和mRNA表达;ELISA检测细胞培养上清液中可溶性ICAM-1(sICAM-1)的水平;Western印迹检测HUVEC磷酸化核因子κB抑制物(p-IκB)的表达.结果 ANCA IgG显著上调中性粒细胞与内皮细胞问的黏附率(P＜0.05),但ANCA IgG+tg19320组较ANCA IgG组黏附率显著降低(P＜0.05).ANCA IgG组与健康人IgG组相比,HUVEC ICAM-1 mRNA及蛋白表达显著增加(P＜0.05).tg19320分别从mRNA和蛋白水平阻断ANCA对ICAM-1的作用(P＜0.05),并显著降低ANCA IgG引起的细胞培养上清液中sICAM水平增高(P＜0.05).ANCA IgG增加HUVEC p-IκB表达,tg19320显著降低p-IκB的表达.结论 tg19320通过抑制IκB磷酸化进而干预NF-κB活化;抑制ANCA IgG对内皮细胞与中性粒细胞问黏附的促进作用,并阻断ICAM-1上调表达.短肽tg19320对原发性小血管炎具有体外保护作用.
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