【摘 要】
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目的利用RecA蛋白介导的同源重组的方法,修饰含全长人β珠蛋白基因簇及一段IL-11受体α链基因的BAC(细菌人工染色体)克隆,建立只包括全长人β珠蛋白基因簇的转基因鼠模型.方
【机 构】
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中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室
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目的利用RecA蛋白介导的同源重组的方法,修饰含全长人β珠蛋白基因簇及一段IL-11受体α链基因的BAC(细菌人工染色体)克隆,建立只包括全长人β珠蛋白基因簇的转基因鼠模型.方法分别在待删除片段上、下游用PCR合成500bp左右的两段同源序列,共同克隆入构建载体pBV的HindⅢ和Xba Ⅰ位点之间,然后以 Sal Ⅰ酶切后将此1 kb的插入片段再克隆入温度敏感型穿梭载体pSV-RecA中,转化含B5-BAC DNA的感受态大肠杆菌DH10B,经氯霉素正筛选和镰孢菌酸(FA)负筛选,获得发生两次同源重组后
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