鸡γ-干扰素的克隆 表达和序列分析

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[目的]为鸡γ-干扰素的进一步研究奠定基础.[方法]根据GenBank发表的鸡γ-干扰素核苷酸序列.设计1对特异性引物.利用RT-PCR技术从ConA诱导培养的鸡脾脏淋巴细胞中克隆鸡γ-干扰素基因,并在IPTG诱导下在大肠杆菌中表达重组菌.[结果]克隆的鸡γ-干扰素基因全长495 bp,编码165个氨基酸,与国外克隆的鸡γ-干扰素基因序列的同源性为100%.鸡γ-干扰素蛋白含有12个α螺旋,3个β折叠,7个β转角.它具有强抗原性,而第16~23位氨基酸无抗原性.重组蛋白的分子量约18 kD,其经IPTG诱导表达4 h后,表达量最高,表达产率高达25%.[结论]鸡γ-干扰素具有一定的抗原性,预示其在免疫反应中起一定作用.
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