鼻咽癌细胞条件培养基诱导THP-1源巨噬细胞向M2型极化

来源 :广西医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yaoyaosara
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目的:探讨鼻咽癌细胞系(5-8F、HONE1)来源的条件培养基(CM)对THP-1来源巨噬细胞极化方向的影响。方法:分别用50 nmol/L、100 nmol/L、200 nmol/L佛波酯(PMA)刺激人单核细胞白血病THP-1细胞诱导分化为M0型巨噬细胞(THP-1-M0组),24 h后,加入10 pg/mL脂多糖(LPS)和20 ng/mL干扰素(IFN)-γ处理细胞72 h,使M0向类M1型细胞方向极化(THP-1-M1组);加入20 ng/mL IL-4和20 ng/mL IL-13处理THP-1-M0使其向类M2型方向极化(THP-1-M2组)。流式细胞术检测巨噬细胞标记物CD14、CD68、CD86、CD163和CD206的表达。制备鼻咽癌5-8F及HONE-1细胞的条件培养基,培养THP-1-M0细胞。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测白细胞介素(IL)-6、IL-10、肿瘤坏死因子(TNF)-α、转化生长因子(TGF)-β1基因表达,分析肿瘤细胞刺激M0巨噬细胞的极化方向。结果:100 nmol/L为PMA的最佳刺激浓度。THP-1-M1组CD68、CD86、CD163表达及IL-6、TNF-α、IL-10、TGF-β1基因表达上调,THP-1-M2组CD14表达下调,CD68、CD86、CD163、CD206表达及IL-10、TGF-β1基因表达上调(均P<0.05)。加入鼻咽癌细胞条件培养基后,TNF-α、TGF-β1表达降低,IL-10表达升高(均P<0.05)。结论:5-8F细胞条件培养基诱导THP-1源M0型巨噬细胞偏向M2表型极化,HONE1细胞条件培养基培养的M0型巨噬细胞极化为M1/M2混合表型。
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