【摘 要】
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【目的】研究胎牛血清（fetal bovine serum, FBS）在猪孤雌囊胚玻璃化冷冻后恢复培养中的作用。【方法】本试验以体外培养第5天的猪孤雌激活囊胚为材料，将新鲜和冷冻囊胚分别在含10%FBS（V/V）的胚胎培养液中继续培养48 h,即分为新鲜组（Fresh）、新鲜+FBS组（Fresh+FBS）、冷冻组（Vitrified）、冷冻+FBS组（Vitrified+FBS）。观察各组囊胚的
【基金项目】
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云南省基础研究计划重点项目（202001AS070001）； 云南省科技人才与平台计划（202005AC160004）； 国家自然科学基金（32260837、31960663）；
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【目的】研究胎牛血清（fetal bovine serum, FBS）在猪孤雌囊胚玻璃化冷冻后恢复培养中的作用。【方法】本试验以体外培养第5天的猪孤雌激活囊胚为材料，将新鲜和冷冻囊胚分别在含10%FBS（V/V）的胚胎培养液中继续培养48 h,即分为新鲜组（Fresh）、新鲜+FBS组（Fresh+FBS）、冷冻组（Vitrified）、冷冻+FBS组（Vitrified+FBS）。观察各组囊胚的扩张和孵化能力，检测胚胎的细胞膜损伤、凋亡细胞数目、总细胞数目、胞内活性氧（ROS）水平、线粒体活性以及发育相关基因的表达水平。【结果】与Fresh和Vitrified组相比，Fresh+FBS和Vitrified+FBS组的完全扩张率、孵化率和囊胚细胞总数均显著提高（P＜0.05）,细胞膜损伤率和细胞凋亡率均显著降低（P＜0.05）。与Fresh组相比，Vitrified组ROS水平显著升高（P＜0.05）,Fresh+FBS和Vitrified+FBS组ROS水平均显著降低（P＜0.05）。Vitrified+FBS组的线粒体活性显著高于Vitrified组（P＜0.05）、显著低于Fresh+FBS组（P＜0.05）,与Fresh组无显著差异（P＞0.05）。相比于Fresh组，Vitrified组POU结构域与类转录因子1（POU5F1）表达水平显著上升（P＜0.05）、过氧化氢酶（CAT）表达水平显著下降（P＜0.05）。增殖细胞核抗原（PCNA）、DNA甲基转移酶3A（DNMT3A）、超氧化物歧化酶1（SOD1）、BCL2相关X蛋白（BAX）/BCL2L1的表达水平在Fresh和Vitrified组之间均无显著性差异（P＞0.05）。Fresh+FBS和Vitrified+FBS组中PCNA、SOD1和CAT的表达水平显著高于Fresh和Vitrified组（P＜0.05）。【结论】体外培养第5天的新鲜和冷冻猪孤雌囊胚在10%FBS中继续培养，其发育能力及胚胎质量均得到明显改善。
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