【摘 要】
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目的研究沉默CD133基因对人肝癌CD133+-HepG2干细胞放射敏感性的影响。方法免疫磁珠分选HepG2细胞;流式细胞术检测分选前后CD133表达率;NOD/SCID小鼠成瘤实验验证其干性;靶向
【机 构】
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重庆医科大学基础医学院放射医学教研室,重庆医科大学附属永川医院神经内科,重庆市肿瘤研究所放疗科,重庆市肿瘤研究所妇瘤科,
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目的研究沉默CD133基因对人肝癌CD133+-HepG2干细胞放射敏感性的影响。方法免疫磁珠分选HepG2细胞;流式细胞术检测分选前后CD133表达率;NOD/SCID小鼠成瘤实验验证其干性;靶向沉默CD133基因并分组(空白组、阴性感染组、阳性感染组);RT-PCR和Western blot检测各组CD133基因mRNA和蛋白表达;克隆形成实验检测各组细胞经不同剂量照射后的克隆形成率及存活率,绘制存活曲线并计算各组细胞放射生物学参数D0、Dq、N及放射增敏比(SER);流式细胞术检测各组细胞周期及凋亡情况。结果流式细胞术检测结果显示,分选前后CD133表达率分别为(1.36±0.20)%和(87.62±1.92)%。CD133+细胞在细胞数为1×103/ml时即可形成皮下移植瘤。RT-PCR和Westernblot检测结果显示,阳性感染组CD133 mRNA和蛋白表达均受到明显抑制。流式细胞术检测结果显示:阳性感染组G1、S期减少G2期增加,细胞凋亡率明显增加。克隆形成实验显示阳性感染组D0、Dq、N值与SF2均减小,放射敏感性明显增强,其SER为(1.37±0.02),差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论 CD133作为肝癌干细胞的表面标志物之一,可能成为肝癌干细胞放射治疗增敏的靶点。
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