微小RNA-10b对人胰腺癌细胞RhoC表达的影响

来源 :中华实验外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mesnower
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读

目的 观察微小RNA(miR)-10b对人胰腺癌细胞AsPC-1细胞(以下简称AsPC-1)表达RhoC蛋白的影响.方法 以脂质体转染法将重组正、反义真核表达载体pPG-CMV-增强绿色荧光蛋白(EGFP)-miR-10b转染AsPC-1细胞株(分为正、反义组),实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)和荧光显微镜检测载体瞬时表达的效率,Matrigel实验评价不同组间细胞迁移侵袭能力的差异;Western blot检测细胞RhoC蛋白的表达.结果 转染正义组miR-10b表达量增加10倍,反义组减少至对照组的14%.差异均有统计学意义(P<0.05).细胞RhoC蛋白的表达水平:正义组为(95.7±8.5)像素单位;反义组为(28.5±5.7)像素单位,差异均有统计学意义(P<0.05);细胞移行实验:正义组移行细胞数为(85±7)个,反义组为(32±5)个,差异有统计学意义(P<0.05);细胞侵袭实验:正义组细胞穿膜细胞数为(35±9)个,反义组为(8±3)个,差异有统计学意义(P<0.05).结论 miR-10b可促进胰腺癌细胞RhoC蛋白的表达,并影响胰腺癌细胞侵袭迁移的能力。

其他文献
目的 探讨p53和K-ras基因突变与表浅性膀胱癌术后复发和生存率的关系.方法 选取表浅性膀胱癌切除术的137例患者,并选取29例正常膀胱黏膜组织作为对照,分别提取组织的DNA,采用聚合酶链反应-单链构象多态性分析(PCR-SSCP)和直接测序法分别分析p53和K-ras基因突变,并探讨p53和K-ras突变与表浅性膀胱癌术后复发及生存率的关系.结果 p53突变主要集中于外显子7和8,K-ras集
目的 观察人胃癌组织中分离培养的间充质干细胞(hGC-MSCs)对胃癌细胞株SGC-7901增殖与侵袭能力的影响.方法 提取hGC-MSCs条件培养液(MSC-CM),用不同浓度(20%、40%、60%)的MSC-CM作用于SGC-7901细胞,噻唑蓝(MTT)法及Transwell侵袭实验检测各组细胞增殖与侵袭能力;实时聚合酶链反应(Real-time PCR)、Western blot和细胞免
随着干细胞研究的不断深入,干细胞移植疗法为脊髓损伤(SCI)的治疗带来了希望.间充质干细胞(MSCs)作为干细胞研究领域中的一类重要细胞,其对于SCI治疗的作用同样受到广泛关注.Zuk等[1]于2001年从人体脂肪组织中发现了1种成纤维细胞样细胞群.采用免疫荧光技术和流式细胞技术检测发现这些细胞为中胚层/间充质来源.随后的研究进一步证实了该类细胞在不同的诱导条件下可分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细
期刊
骨肉瘤靶向治疗方法较多,机制各异[1].我们通过席弗碱原理(西佛碱),以亲骨性药物——阿仑膦酸钠(ALN)为骨导向部分,制备骨靶向药物表阿霉素(EPI)-氧化葡聚糖-ALN聚合物,探讨亲骨性药物在骨肉瘤靶向治疗中的作用及机制.一、材料和方法1.材料:ALN、EPI、葡聚糖T-40、高碘酸钠、钼酸铵、截流相对分子质量3 500的透析袋、葡聚糖凝胶G-50、葡聚糖标样(Dex)。
期刊
环氧合酶-2(COX-2)参与了多种肿瘤的发生和发展过程[1],COX-2抑制剂塞来昔布可以有效抑制人肝癌细胞HepG2裸小鼠移植瘤生长及肿瘤血管生成,其作用是通过抑制COX-2的表达来实现的[2].本实验旨在观察α-干扰素(α-IFN)和COX-2抑制剂塞来昔布对体外培养的人肝癌SMMC-7721细胞生长的协同抑制作用。
期刊
前列腺是一个外分泌腺体,同时也是人生殖道的一部分.前列腺的生长依赖于整合类固醇激素信号、间质细胞和上皮细胞之间旁分泌的相互作用和细胞自主因素而实现.近年来,在基础研究方面,随着全基因组技术的发展,包括基因序列分析、表达谱基因芯片分析等高通量分析方法的不断涌现,前列腺疾病的基础研究取得了显著的进展.在临床研究方面,随着微创医学、转化医学等不断发展,为前列腺外科的发展提供了新的契机.我们对常见的前列腺
期刊
目的 探讨微小RNA(miRNA,miR)-30a在乳腺癌组织中的表达及其临床意义.方法 搜集46例具有完整临床病理资料及5年以上随访资料的石蜡包埋乳腺癌组织及其配对癌旁组织的病例.抽提总RNA,采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术检测miR-30a在乳腺癌及其癌旁组织中的表达水平,并分析其与临床病理特征和患者预后的关系.结果 36例癌组织中miR-30 mRNA的相对表达水平为4.2
目的 探讨CD4+ CD25+ Treg细胞对树突状细胞(DC)诱导的细胞毒性T细胞(CTL)对B16黑色素瘤抑瘤作用的影响及其机制.方法 制备C57BL/6小鼠B16黑色素瘤动物模型,行全身放疗达非髓性淋巴细胞删除(NMLD)状态.随机将80只小鼠分为4组.A组:在DC与T细胞共同培养前应用免疫磁珠法(MACS)删除CD4+ CD25+ Treg细胞;B组:DC与T细胞共同培养后删除CD4+ C
目的 通过转染过表达水通道蛋白-8(AQP-8)的真核表达载体,观察AQP-8对结肠癌HT-29细胞株多药耐药因子表达的影响.方法 取对数生长期的人结肠癌HT-29细胞株用于实验.构建绿色荧光蛋白(GFP)-AQP-8真核表达载体并转染至HT-29细胞,通过Western blot检测GFP-AQP-8转染效率;采用噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞增殖抑制率;通过实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PC
骨质疏松症(OP)是一种以骨量低下,骨微结构损坏,导致骨脆性增加,易发生骨折为特征的全身性骨病(世界卫生组织,WHO)[1].近年来研究表明一氧化氮(NO)、内皮素(ET)、降钙素基因相关肽(CGRP)均是骨代谢的重要调节因子,三者水平的变化均可导致骨吸收增加,骨形成减少,骨吸收与骨形成之间平衡失调,骨密度下降,从而诱导或参与骨质疏松的发生发展[2-4],现对ET、NO及CGRP与骨质疏松症的相关
期刊