单胚RT-PCR:基因表达动态研究及应用技术探讨

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为进一步探讨单胚RT-PCR技术的适用性,我们测试了3个特定的基因STM、MP和ASKη在拟南芥(Arabidopsis thaliana(L.)Heynh.)早期胚胎发生过程中的动态表达情况。进一步证实以该技术研究某些特定基因的表达动态是可行的。着重探讨了扩增产量与模板量的对应关系、基因组DNA的干扰以及DNase Ⅰ处理过程中的mRNA降解等主要技术问题。结果表明:材料制备时显微操作技术的稳定是确保单胚RT-PCR结果稳定的关键。应尽量缩短DNase Ⅰ处理时间,以避免mRNA降解。
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