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目的 对中国医学细菌保藏管理中心收集保藏的肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae,KP)进行分子生物学特征分析.方法 对20株保藏KP菌株采用16S rRNA扩增及测序和质谱技术进行菌种鉴定验证;拉丝试验确定黏液表型;PCR筛查6种常见高毒力荚膜血清型(K1、K2、K5、K20、K54和K57);采用多位点序列分型(MLST)对菌株进行分子分型.结果 20株菌种均扩增出预期大小的16S rRNA基因片段,与KP模式菌株参考序列的相似性均>99％;质谱技术检测均为KP,其中有4株鉴定到亚种;拉丝试验阳性率30％(6/20);共检出K2型3株(15％)、K5型4株(20％)、K54型1株(5％)、K57型4株(20％)和未分型8株;20株菌种分为10个ST型.结论 该研究完善了KP菌株的分子生物学方面的质控指标.