【摘 要】
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目的 观察Wnt-1诱导分泌蛋白2(WISP-2)基因敲降与乳腺癌细胞增殖活性的相关性以及WISP-2调控S期激酶相关蛋白2(Skp2)和p27Kip1在乳腺癌移植瘤形成中的作用.方法 MCF-7乳腺癌
【机 构】
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300381,天津中医药大学第一附属医院病理科;天津中医药大学;300381,天津中医药大学第一附属医院肿瘤科;300381,天津中医药大学第一附属医院实验中心
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目的 观察Wnt-1诱导分泌蛋白2(WISP-2)基因敲降与乳腺癌细胞增殖活性的相关性以及WISP-2调控S期激酶相关蛋白2(Skp2)和p27Kip1在乳腺癌移植瘤形成中的作用.方法 MCF-7乳腺癌细胞分为三组:A组为正常培养细胞;B组为WISP-2短发夹RNA(shRNA)质粒转染细胞;C组为空质粒转染细胞.MTT法检测WISP-2基因敲降对MCF-7细胞增殖活性的影响.取45只SPF级健康BALB/c雌性裸鼠,随机均分为D、E和F三组,分别于裸鼠右腋部皮下接种0.2mL携带WISP-2 shRNA质粒转染、空质粒转染和正常培养的生长密度为每毫升1×106个的MCF-7细胞;14d后,肿瘤最小直径达到0.5 cm视为移植瘤形成.分别采用荧光定量RT-PCR法和Westernblot法检测三组移植瘤中WISP-2、Skp2和p27Kip1 mRNA和蛋白水平.结果 B组细胞增殖活性高于A组和C组(P＜0.05).D组WISP-2和p27Kip1 mRNA和蛋白水平低于E组和F组(P＜0.05),而Skp2 mRNA和蛋白水平高于E组和F组(P＜0.05).结论 WISP-2基因敲降导致Skp2和p27Kip1mRNA和蛋白水平异常,诱导乳腺癌细胞增殖,促进乳腺癌移植瘤形成.
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