EGFP-线粒体蛋白导入载体的构建及功能验证

来源 :基础医学与临床 | 被引量 : 0次 | 上传用户：gaoyaoyang22

【摘要】

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目的构建能够将外源蛋白导入真核细胞线粒体的真核表达载体,并且通过增强型绿色荧光蛋白的表达进行示踪。方法利用多重PCR扩增法将线粒体导肽序列与EGFP序列融合在一起,并插

【作者】

：

乔录新张玉林丁渭陈德喜

【机构】

：

首都医科大学附属北京佑安医院感染科

【出处】

：

基础医学与临床

【发表日期】

：

2012年9期

【关键词】

：

表达载体绿色荧光蛋白线粒体导肽 expression vector green fluorescent protein mitochondrial tran

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目的构建能够将外源蛋白导入真核细胞线粒体的真核表达载体,并且通过增强型绿色荧光蛋白的表达进行示踪。方法利用多重PCR扩增法将线粒体导肽序列与EGFP序列融合在一起,并插入真核表达载体pcDNA3.1,构建成真核表达载体pcDNA5.1-EGFP。将P53基因分别插入pcDNA5.1-EGFP和pcDNA3.1构建成pcDNA5.1-P53和pcDNA3.1-P53载体。经酶切和测序验证后在脂质体介导下分别将上述载体转染293T细胞,一方面在荧光显微镜下比较绿色荧光蛋白与细胞色素C在细胞内的分布情况,另一方

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