论文部分内容阅读
目的构建人源dickkopf1（dkk1）基因的原核表达质粒，表达、纯化、鉴定其表达产物。方法自足底皮肤组织提取成纤维细胞，抽提mRNA，RT-PCR获得人源dkk1基因片断，构建重组质粒PQE30-dkk1；转化至大肠杆菌内，诱导表达，超声裂菌、镍琼脂糖凝胶层析纯化表达产物，SDS—PAGE电泳、Western Blot鉴定表达产物。结果RT—PCR获得片断与预期结果相符，双酶切鉴定、测序鉴定证实重组质粒PQE30-dkk1构建成功；SDS—PAGE电泳、抗Dkk1抗体Western Blot鉴定表达产