【摘 要】
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目的建立一种稳定、高效的大鼠库普弗细胞(KCs)分离培养方法.方法采用大鼠肝脏离体链酶蛋白酶E消化和胶原酶循环灌注消化,低速离心去除肝细胞,Histodenz不连续密度梯度离心和
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目的建立一种稳定、高效的大鼠库普弗细胞(KCs)分离培养方法.方法采用大鼠肝脏离体链酶蛋白酶E消化和胶原酶循环灌注消化,低速离心去除肝细胞,Histodenz不连续密度梯度离心和选择性贴壁的方法分离KCs.采用ED2 CD163、兔抗大鼠溶酶体膜相关蛋白2(LAMP2)免疫细胞化学,latex-beads吞噬实验和电镜观察来鉴定KCs.结果KCs得率为5×107个,活率为98%,经鉴定ED2阳性细胞大于98%,LAMP2阳性细胞大于99%,吞噬试验及电镜观察证明分离所得为KCs.结论改良的分离培养方法稳定、高效,为进一步的研究打下了基础.
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