【摘 要】
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应用分子克隆技术,依照GenBank中金黄色葡萄球菌Sortase A基因序列设计引物,构建重组表达载体;采用荧光淬灭检测法观察芦丁对金黄色葡萄球菌Sortase A活性的抑制作用,并通过
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应用分子克隆技术,依照GenBank中金黄色葡萄球菌Sortase A基因序列设计引物,构建重组表达载体;采用荧光淬灭检测法观察芦丁对金黄色葡萄球菌Sortase A活性的抑制作用,并通过纤维蛋白原结合试验考察芦丁对由Sortase A介导的金黄色葡萄球菌黏附纤维蛋白原的影响。结果表明:成功构建了重组表达载体pET-SrtAΔN59,并纯化出Sortase A蛋白。荧光检测结果显示,芦丁对Sortase A的活性具有一定的抑制作用。当芦丁浓度为128,64,32,16,8μg/mL时,对Sortase A的抑制率分别为63.58%,62.80%,47.43%,20.37%,13.26%,IC50为57μmol/L;纤维蛋白原结合试验表明,芦丁对金黄色葡萄球菌的黏附具有一定的抑制作用。当芦丁浓度为64μg/mL时,黏附率为27.97%,与阴性对照组相比显著降低(P<0.01)。
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