免疫荧光检测人血清视神经脊髓炎免疫球蛋白G的实验方法

来源 :中华神经科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:rainxiao
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目的 建立检测神经脊髓炎免疫球蛋白G(NMO-IgG)的间接免疫荧光方法,描述其注意事项.方法 选择C57小鼠小脑、中脑、肾脏和胃冰冻切片作为基质.人血清经稀释、豚鼠肝粉预处理后,滴加于封闭液处理的上述切片,4℃过夜后滴加荧光素结合的羊抗人IgG的抗体,封片、荧光显微镜观察.实验通过荧光双标技术确定NMO-Igc结合部位与AQP4表达位置是否一致.结果 测定了182份人血清,通过间接免疫荧光法证实部分NMO、MS、脊髓炎、视神经炎患者血清有NMO-IgG结合到小鼠的软脑膜、脑膜下和脑、脊髓的毛细血管部位.荧光双标技术显示NMO-IgG的结合位置与AQP4表达的位置完全一致.豚鼠肝粉-PBS液对照及空白对照无特异荧光.结论 以C57小鼠的小脑、肾脏和胃冰冻切片作为基质,通过间接免疫荧光法能成功检测出人血清中的NMO-IgG抗体,有助于我们对NMO进行诊断与鉴别诊断。

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