【摘 要】
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[摘要]目的：构建靶向VEGF基因的SiRNA慢病毒载体，并包装病毒。 方法：针对已经筛选确定的SiRNA 有效靶序列，合成靶序列的OligoDNA，经双酶切后与PGC SIL-GFP慢病毒载体连接，构建慢病毒载体PGCSIL-SiVEGF，以293T细胞包装得到干扰病毒LV-SiVEGF，根据细胞表达绿色荧光蛋白水平计算病毒滴度；病毒感染人脐静脉内皮细胞HUVEC，通过定量RT-PCR检测VEG
【机 构】
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第四军医大学西京医院全军整形外科研究所
【基金项目】
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国家自然科学基金（30870982）
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目的：构建靶向VEGF基因的SiRNA慢病毒载体,并包装病毒。方法：针对已经筛选确定的SiRNA有效靶序列,合成靶序列的OligoDNA,经双酶切后与PGC SIL-GFP慢病毒载体连接,构建慢病毒载体PGCSIL-SiVEGF,以293T细胞包装得到干扰病毒LV-SiVEGF,根据细胞表达绿色荧光蛋白水平计算病毒滴度;病毒感染人脐静脉内皮细胞HUVEC,通过定量RT-PCR检测VEGF的mRNA表达。结果：测序结果表明,靶向人VEGF的SiRNA慢病毒载体构建成功,包装后的慢病毒滴度为2×10
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