【摘 要】
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目的 探讨微小RNA(micro RNA,miR)-19b对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem sells,BMSCs)分化的影响,并研究其协同5-氮胞苷(5-azacytidine,5-aza)对BMSCs分化成心肌样细胞的作用.方法 分离培养SD大鼠BMSCs,细胞鉴定后使用miR-19b mimics/inhibitor转染BMSCs,实时荧光定量聚合酶链反应(real time quantitative polymerase chain reaction,q
【机 构】
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武汉科技大学附属天佑医院,武汉430064;上海市第十人民医院,上海200072
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目的 探讨微小RNA(micro RNA,miR)-19b对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem sells,BMSCs)分化的影响,并研究其协同5-氮胞苷(5-azacytidine,5-aza)对BMSCs分化成心肌样细胞的作用.方法 分离培养SD大鼠BMSCs,细胞鉴定后使用miR-19b mimics/inhibitor转染BMSCs,实时荧光定量聚合酶链反应(real time quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测转染效率.采用10μmol/L 5-aza干预转染后的BMSCs,观察细胞形态学变化.采用Western blot检测诱导后BMSCs中心房钠尿肽(atrial natriuretic peptide,ANP)、心肌肌钙蛋白I(cardiac troponin I,cTnI)、和心肌肌钙蛋白T(cardiac troponin T,cTnT)表达.结果 与5-aza诱导的BMSCs相比,miR-19b mimics转染后的BMSCs无明显形态学变化,5-aza诱导的miR-19b mimics组细胞形态变化最大,细胞体积变大,细胞聚集呈涡旋样,而5-aza诱导的miR-19b inhibitor组细胞形态变化不明显.与对照组比较,miR-19b mimics组ANP、cTnI及cTnT蛋白表达水平明显升高,而miR-19b inhibitor组ANP、cTnI及cTnT蛋白表达水平明显降低.结论 miR-19b无诱导BMSCs分化的能力,但协同5-aza诱导BMSCs可提高其向心肌样细胞分化的能力.
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