【摘 要】
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DNA双链断裂(DNA double strand breaks,DSBs)是细胞DNA损伤类型中最严重的一种.DS-Bs可以激活细胞的DNA损伤应答(DNA damage response,DDR)机制,从而使组蛋白H2AX迅速磷酸化
【机 构】
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国家上海新药安全评价研究中心,上海,201210
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DNA双链断裂(DNA double strand breaks,DSBs)是细胞DNA损伤类型中最严重的一种.DS-Bs可以激活细胞的DNA损伤应答(DNA damage response,DDR)机制,从而使组蛋白H2AX迅速磷酸化(磷酸化的H2AX组蛋白被称为γ-H2AX).随后,γ-H2AX聚集在双链断裂处,形成由大量γ-H2AX聚集成的灶点(foci).检测细胞中的γ-H2AX灶点数目就可以用于评价DNA双链断裂情况,进而可以用来评价遗传毒性因子的致突变能力.目前,国内外有多种对γ-H2AX灶点的检测方法,包括蛋白质印迹法(Western blotting)、免疫荧光染色显微镜检测法、全细胞酶联免疫反应(Whole-cell ELISA)检测法和流式细胞术检测法等,每种方法各有优缺点.本文将重点阐述近几年国内外γ-H2AX检测方法的新进展,并总结对比不同方法之间的操作步骤、统计参数及优缺点,分析γ-H2AX检测方法在遗传毒理方面的应用前景.
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