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目的
确定布氏田鼠细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ)基因巢式PCR扩增的方法。
方法采集内蒙古锡林郭勒盟阿巴嘎旗青格勒宝拉格地区的布氏田鼠12只,取肝脏组织,提取DNA,采用巢式PCR方法扩增COⅠ基因,并对扩增产物进行测序。
结果巣氏PCR内外引物分别扩增出657、1 132 bp的产物,与目的片段大小一致。内引物PCR扩增共获得12条布氏田鼠COⅠ基因序列片段,测序均为COⅠ基因片段,在GenBank中序列号为KF182196-KF182207; 12条COⅠ基因序列进行比对,相似性为100%,无碱基的变异。
结论巣氏PCR方法可有效扩增出布氏田鼠COⅠ基因,避免产生假基因现象。