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基质辅助激光解吸/电离-飞行时间质谱成像（matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight imaging mass spectrometry，MALDI-TOF-IMS）技术已成为目前蛋白质组学研究中的经典技术，是一种研究生物组织切片中蛋白质和小分子物质分布的工具。MALDI-TOF-IMS通过单次扫描就能够同时分析生物组织切片中的各种未知组分，在保持组织中细胞和分子完整性的同时获取组织的分子成像图。近年来，质谱成像技术在生物医学各领域中有了较快发展，本文综合文献资料对MALDI-TOF-IMS技术目前的发展水平、质谱成像原理、方法学以及在法医病理学中的应用前景进行了综述。