【摘 要】
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目的 探讨三氧化二砷(As2O3)诱导人视网膜母细胞瘤(RB)Y79细胞系P16基因去甲基化及转录激活的可能机制. 方法四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT)法检测As2O3对Y79细胞生长
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目的 探讨三氧化二砷(As2O3)诱导人视网膜母细胞瘤(RB)Y79细胞系P16基因去甲基化及转录激活的可能机制. 方法四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT)法检测As2O3对Y79细胞生长和增生的抑制作用;流式细胞仪DNA含量分析法探讨As2O33对Y79细胞周期的影响;巢式甲基特异性聚合酶链反应法(n-MSP)及DNA克隆测序分析法检测As2O3作用前后Y79细胞P16基因甲基化状态;逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测P16基因、DNA甲基转移酶(DNMT3A、DNMT3B)基因mRNA的表达. 结果 As2O3能明显抑制Y79细胞生长,使细胞阻滞于G0～G期;未处理组细胞P16基因不表达,As2O3作用48 h后P16基因表达增强,甲基化程度减弱,甲基转移酶DNMT3A、DNMT3B mRNA表达下降. 结论 RB Y79细胞系存在P16基因高甲基化,As2O3通过抑制DNA甲基转移酶mRNA表达诱导P16基因去甲基化,显著上调P16基因mRNA表达,将细胞阻滞于G0～G期,抑制Y79细胞增生.
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