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[摘要]目的：分析讨HIV抗体检测结果不确定时应用核酸诊断的可行性。方法：在2015年6月-2016年7月期间某疾控中心运用蛋白免疫印迹（WB）法对我市HIV抗体呈阳性的1568份血清样本进行确证，其中有50例确证结果显示为不确定，且病例的背景资料完整、初次血浆的留样在1000u L以上，运用样核酸检测对其进行进一步诊断，并将其诊断结果与抗体随访的检测结果予以比较，探讨核酸对于HIV抗体检测结果不确定时诊断的可行性。结果：50例经确证不确定的血清样本，其中24例检出了HIV核酸，对其19例进行随访，发现18例患者的HIV抗体转为阳性，另1例的带型出现进展但不符合诊断的标准：26例患者的核酸呈阴性，其中8例患者成功随访，且WB条带均进展或是阴性。结论：针对确证不确定的病例应予以核酸检测以尽早的诊断和确诊，核酸检测对于不确定病例表现出较强的敏感性与特异性，其可以作为HIV检测的辅助检测手段，从而为疾病的提供诊断的依据。
[关键词]HIV抗体检测，蛋白免疫印迹试验，核酸诊断，可行性
[中图分类号]R512.91 [文献标识码]A [文章编号]2096-5249（2019）16-0219-01
当前，艾滋病的实验室确证过程中最常用的检测方法就是蛋白印迹试验（WB）。依照最終的确证结果，相应的检测报告包括HIV抗体阳性、HIV抗体阴性及HIV抗体不确定3种。相关的医学研究表明，WB确证过程中，对于HIV抗体不确定的病例相应占比高达10%～20%左右。依照《艾滋病与HIV病毒感染的诊断标准》相关规定，对于检测为HIV抗体不确定的病例，应要求其在1个月以后再次进行复检，而在此期间将会对被检者带来巨大的身心压力，同时也会影响疾病的诊断和治疗，贻误最佳的治疗时机，加重患者病情，也会带来较大的传染风险。
1临床资料与方法
1.1临床资料在2015年6月-2016年7月期间某疾控中心运用蛋白免疫印迹（WB）法对我院HIV抗体呈阳性的1568份血清样本进行确证，其中有50例确证结果显示为不确定，且病例的背景资料完整、初次血浆的留样在1000uL以上。
1.2方法（1）检测方法：回顾性分析此次研究所有确证不确定病例其血清HIV抗体检测情况及相应的流行病学资料，对所有的样本施以核酸检测。HIV抗体的检测方法将根据研究对象其来源的不同而选择不同的方法，主要包括HIV抗体临床常规检测及高危人群艾滋病的自愿咨询检测两种，以此开展HIV抗体的初筛与确证试验。实验室确证运用WB试验，针对WB实验反馈结果显示为不确定的病例予以跟踪随访。然后对所有确证结果不确定的血清样本施以核酸检测（VL），要求所有的实验操作均应严格依照《全国艾滋病相关检测技术规范（2009年修订版）》中相关规定实施。
（2）试剂：HIV抗体的筛查实验所用试剂包括美国Abbot便捷初筛试剂以及由法国生物梅里埃有效公司研制的酶联免疫吸附试验（ELISA）专用试剂盒;HIV抗体确证试验所用试剂由新加坡MP生物医学亚太私人有限公司所提供的HIVBlot2.2型试剂盒;核酸检测所用试剂是由德国罗氏公司所提供的人类免疫缺陷病毒（I型）核酸定量检测试剂盒。
（3）WB试验结果的判定标准：包含2条env带与gag带或是pol带则记为HIV抗体阳性;没有HIV抗体的特异带出现，则记为HIV抗体阴性;若出现了HIV抗体的特异带，且不满足阳性判定标准，则记为HIV抗体的不确定。
（4）核酸结果的判定标准：病毒的载量在5000拷贝/ml以上则记为HIV感染;若病毒的载量不足20拷贝/ml，即最低的检测界限，则记为未感染HIV。
2结果
50例确证结果为不确定病例中，强制劳教的戒毒人员与VCT门诊人员分别为13例和12例，相应占比分别为26.0%和24.0%;产检患者4例，相应占比为8.0%;医务人员主动给予HIV检测咨询（PITC）的门诊患者3例，相应占比为6.0%;感染者的配偶与性伴分别为2例和3例，相应占比分别为4.0%和6.0%;同性性行为者与娱乐场所相关人员分别为2例，相应占比为4.0%;其他11例，相应占比为22.0%。
50例经确证不确定的血清样本，其中24例检出了HIV核酸，对其19例进行随访，发现18例患者的HIV抗体转为阳性，另1例的带型出现进展但不符合诊断的标准;26例患者的核酸呈阴性，其中8例患者成功随访，且WB条带均进展或是阴性。
3讨论
当前国内对于艾滋病的确证实验室中对于HIV/AIDS的诊断过程中，主要是将HIV抗体的检测结果来作为最后的判断依据，而一旦出现H1V抗体不确定病例的结果，包括多方面的因素，如方法学的选择、被检者其自身机体免疫状况等。HIV在感染人体以后通常需要经过2个月至3个月时间，即HIV感染的急性期，—些患者的体内此时还没有出现抗体或是所出现的抗体其含量和水平较低，通过抗体检测很难得到明确而可靠的检测结果。而在急性期的患者体内能够检测出较高的病毒载量，因而通过核酸检测能够对窗口期的感染患者予以明确的检查和诊断。
此次研究经实验室确证的50例HIV抗体不确定病例来源主要包括强制劳教的戒毒人员、VCT门诊人员、产检患者、医务人员主动给予HIV检测咨询（PITC）的门诊患者、感染者的配偶与性伴侣、同性性行为者与娱乐场所相关人员及其他。综上，针对确证不确定的病例应予以核酸检测以尽早的诊断和确诊，核酸检测对于不确定病例表现出较强的敏感性与特异性，其可以作为HIV检测的辅助检测手段，从而为疾病的提供诊断的依据。
[关键词]HIV抗体检测，蛋白免疫印迹试验，核酸诊断，可行性
[中图分类号]R512.91 [文献标识码]A [文章编号]2096-5249（2019）16-0219-01
当前，艾滋病的实验室确证过程中最常用的检测方法就是蛋白印迹试验（WB）。依照最終的确证结果，相应的检测报告包括HIV抗体阳性、HIV抗体阴性及HIV抗体不确定3种。相关的医学研究表明，WB确证过程中，对于HIV抗体不确定的病例相应占比高达10%～20%左右。依照《艾滋病与HIV病毒感染的诊断标准》相关规定，对于检测为HIV抗体不确定的病例，应要求其在1个月以后再次进行复检，而在此期间将会对被检者带来巨大的身心压力，同时也会影响疾病的诊断和治疗，贻误最佳的治疗时机，加重患者病情，也会带来较大的传染风险。
1临床资料与方法
1.1临床资料在2015年6月-2016年7月期间某疾控中心运用蛋白免疫印迹（WB）法对我院HIV抗体呈阳性的1568份血清样本进行确证，其中有50例确证结果显示为不确定，且病例的背景资料完整、初次血浆的留样在1000uL以上。
1.2方法（1）检测方法：回顾性分析此次研究所有确证不确定病例其血清HIV抗体检测情况及相应的流行病学资料，对所有的样本施以核酸检测。HIV抗体的检测方法将根据研究对象其来源的不同而选择不同的方法，主要包括HIV抗体临床常规检测及高危人群艾滋病的自愿咨询检测两种，以此开展HIV抗体的初筛与确证试验。实验室确证运用WB试验，针对WB实验反馈结果显示为不确定的病例予以跟踪随访。然后对所有确证结果不确定的血清样本施以核酸检测（VL），要求所有的实验操作均应严格依照《全国艾滋病相关检测技术规范（2009年修订版）》中相关规定实施。
（2）试剂：HIV抗体的筛查实验所用试剂包括美国Abbot便捷初筛试剂以及由法国生物梅里埃有效公司研制的酶联免疫吸附试验（ELISA）专用试剂盒;HIV抗体确证试验所用试剂由新加坡MP生物医学亚太私人有限公司所提供的HIVBlot2.2型试剂盒;核酸检测所用试剂是由德国罗氏公司所提供的人类免疫缺陷病毒（I型）核酸定量检测试剂盒。
（3）WB试验结果的判定标准：包含2条env带与gag带或是pol带则记为HIV抗体阳性;没有HIV抗体的特异带出现，则记为HIV抗体阴性;若出现了HIV抗体的特异带，且不满足阳性判定标准，则记为HIV抗体的不确定。
（4）核酸结果的判定标准：病毒的载量在5000拷贝/ml以上则记为HIV感染;若病毒的载量不足20拷贝/ml，即最低的检测界限，则记为未感染HIV。
2结果
50例确证结果为不确定病例中，强制劳教的戒毒人员与VCT门诊人员分别为13例和12例，相应占比分别为26.0%和24.0%;产检患者4例，相应占比为8.0%;医务人员主动给予HIV检测咨询（PITC）的门诊患者3例，相应占比为6.0%;感染者的配偶与性伴分别为2例和3例，相应占比分别为4.0%和6.0%;同性性行为者与娱乐场所相关人员分别为2例，相应占比为4.0%;其他11例，相应占比为22.0%。
50例经确证不确定的血清样本，其中24例检出了HIV核酸，对其19例进行随访，发现18例患者的HIV抗体转为阳性，另1例的带型出现进展但不符合诊断的标准;26例患者的核酸呈阴性，其中8例患者成功随访，且WB条带均进展或是阴性。
3讨论
当前国内对于艾滋病的确证实验室中对于HIV/AIDS的诊断过程中，主要是将HIV抗体的检测结果来作为最后的判断依据，而一旦出现H1V抗体不确定病例的结果，包括多方面的因素，如方法学的选择、被检者其自身机体免疫状况等。HIV在感染人体以后通常需要经过2个月至3个月时间，即HIV感染的急性期，—些患者的体内此时还没有出现抗体或是所出现的抗体其含量和水平较低，通过抗体检测很难得到明确而可靠的检测结果。而在急性期的患者体内能够检测出较高的病毒载量，因而通过核酸检测能够对窗口期的感染患者予以明确的检查和诊断。
此次研究经实验室确证的50例HIV抗体不确定病例来源主要包括强制劳教的戒毒人员、VCT门诊人员、产检患者、医务人员主动给予HIV检测咨询（PITC）的门诊患者、感染者的配偶与性伴侣、同性性行为者与娱乐场所相关人员及其他。综上，针对确证不确定的病例应予以核酸检测以尽早的诊断和确诊，核酸检测对于不确定病例表现出较强的敏感性与特异性，其可以作为HIV检测的辅助检测手段，从而为疾病的提供诊断的依据。