Bisperoxovanadium[bpV(pic)]对大鼠脊髓损伤中自噬的影响及机制研究

来源 :中华实验外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:guoqy
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目的:探讨Bisperoxovanadium[bpV(pic)]对脊髓损伤(SCI)后自噬的影响及其机制。方法:将20只SD大鼠购自右江民族医学院动物中心按随机数字表法分为假手术组、SCI组、bpV(pic)组;假手术组4只,另外两组每组8只。假手术组只行椎板切除术,不造成SCI;SCI组按Allen’s法制做SCI模型,不进行其他干预处理;bpV(pic)组在SCI模型基础上予bpV(pic)干预处理。伤后6 h、1、3、7、14 d对各组大鼠进行运动功能Basso-Beattie-Bresnahan(BBB)评分。伤后2周对SCI组和bpV(pic)组SCI部位进行切片后苏木精-伊红(HE)染色和尼氏染色分析病理变化;免疫荧光分析SCI组和bpV(pic)组的LC3B蛋白变化,免疫印迹分析LC3B、Beclin1和磷酸化第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因(PTEN)及磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)的蛋白变化。2周后通过免疫组织化学进一步验证SCI组与bpv(pic)组磷酸化PTEN的变化。采用两独立样本的n t检验。n 结果:假手术组的大鼠并没有出现运动功能的障碍,BBB评分一直稳定在21分左右。在SCI手术对照组,大鼠出现严重的运动功能失调,第7天,SCI手术对照组BBB评分为(6.02±1.02)分,bpv(pic)治疗组为[(7.82±0.11)分,n t=3.039,n P<0.05],第14天SCI手术对照组评分为(8.87±1.29)分,bpv(pic)治疗组为[(12.02±1.12)分,n t=4.211,n P<0.05],尼氏染色结果显示SCI手术组阳性率(12.45±1.90)%,bpv(pic)治疗组为(24.14±2.09)%,n t=7.154,n P<0.05],差异均有统计学意义。LC3B免疫荧光结果显示,SCI手术组阳性率为(7.71±2.08)%,bpv(pic)治疗组为(21.14±1.97)%(n t=9.352,n P<0.05),免疫印迹染色,LC3B SCI手术组相对表达量为0.32±0.12,bpv(pic)治疗组为2.67±0.21(n t=17.110,n P<0.05);Beclin1,SCI手术组相对表达量为0.86±0.22,bpv(pic)治疗组为1.91±0.31(n t=4.784,n P<0.05),差异均有统计学意义。免疫印迹法结果显示,SCI手术组p-pten相对表达量为0.31±0.05,bpv(pic)治疗组为0.19±0.04(n t=3.246,n P<0.05);SCI手术组p-ERK1/2相对表达量为0.03±0.01,bpv(pic)治疗组为0.95±0.20(n t=7.785,n P<0.05);免疫荧光,p-ERK1/2 SCI手术组阳性率(19.91±1.18)%,bpv(pic)治疗组为(52.43±3.97)%(n t=17.620,n P<0.05),差异均有统计学意义。n 结论:bpV(pic)能明显改善大鼠SCI后的神经修复及运动功能恢复,其可能机制是bpV(pic)通过抑制PTEN的磷酸化活性,进而激活ERK1/2信号,增强神经细胞的自噬,进而促进损伤修复。
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