论文部分内容阅读
目的
探讨钙调神经磷酸酶(CaN)基因沉默对乳鼠肥大心室肌细胞瞬时外向钾电流(Ito)离子通道重构和动作电位时程(APD)的影响。
方法1 d龄Sprague-Dawley乳鼠心室肌细胞，培养48 h后换无血清培养基，分组干预48 h：null组为空腺病毒载体干预，null＋PE组为空腺病毒载体联合苯肾上腺素(PE)干预，Ad-CnAβshRNA1(A1)组给予重组腺病毒shRNA干扰载体介导沉默编码CaN之A亚基β亚型(CnAβ)基因干预，A1＋PE组为Ad-CnAβshRNA1联合PE干预。适时荧光定量逆转录PCR检测Kv4.2基因表达。免疫印迹法检测CnAβ和Kv4.2蛋白表达。全细胞膜片钳技术记录Ito及动作电位。
结果PE刺激使心室肌细胞肥大，CnAβ蛋白表达上调，Kv4.2基因和蛋白表达下调，Ito离子通道电流密度减小、APD延长。沉默CnAβ基因明显抑制PE刺激的上述效应。
结论CnAβ基因沉默抑制PE诱导的肥大乳鼠心室肌细胞Ito离子通道重构和APD改变。