抗人结肠癌单抗MC5的功能性ScFv在大肠杆菌中的可溶性表达

来源 :免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：MyraChen

【摘要】

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目的制备抗人结肠癌单抗MC5的具功能活性的可溶性单链可变区片段(ScFv).方法从分泌MC5的杂交瘤细胞分离mRNA,RT-PCR分别扩增抗体质量、轻链可变区基因(VH和VL DNA),经linker

【作者】

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何凤田郑英如高会广陈姗李蓉芬江渝彭家和钟小林

【机构】

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第三军医大学生物化学与分子生物学教研室

【出处】

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免疫学杂志

【发表日期】

：

2003年1期

【关键词】

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大肠杆菌可溶性表达 ScFv抗体结肠癌噬菌体呈现原核表达 ScFv antibody Colorectal carcinoma Phage displa

【基金项目】

：

重庆市应用基础研究基金

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目的制备抗人结肠癌单抗MC5的具功能活性的可溶性单链可变区片段(ScFv).方法从分泌MC5的杂交瘤细胞分离mRNA,RT-PCR分别扩增抗体质量、轻链可变区基因(VH和VL DNA),经linker DNA连接形成ScFv DNA.将ScFv DNA与噬粒载体pCANTAB5E的连接产物转化于大肠杆菌TG1,转化菌经辅助噬菌体M13KO7感染后,获得重组噬菌体.以高表达MC5结合抗原的人结肠癌细胞系SW480对重组噬菌体进行 2轮筛选后,经ELISA筛选呈现抗体ScFv片段的噬菌体单克隆.取2个强阳性克

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