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为了构建绿色荧光蛋白 ＡｃＧＦＰ１基因的原核表达载体 ｐＥＴ３２ａ-ＡｃＧＦＰ１，并诱导使其在大肠杆菌中高效表达，本研究以 ｐＩＲＥＳ-ＡｃＧＦＰ１质粒为模板，采用 ＰＣＲ技术特异性扩增绿色荧光蛋白 ＡｃＧＦＰ１基因，通过酶切和连接使其与原核表达载体 ｐＥＴ３２ａ（＋）构成重组子，经 ＰＣＲ、酶切和测序鉴定后，重组质粒转化大肠杆菌Ｒｏｓｅｔｔａ（ＤＥ３），用不同浓度的异丙基硫代半乳糖苷 （ＩＰＴＧ）诱导表达绿色荧光蛋白，经 １５％ ＳＤＳ-ＰＡＧＥ鉴定，结果显示：重组质粒 ｐＥＴ３２ａ-ＡｃＧＦＰ１中的