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sTNFRII-gAD-Fc融合蛋白在CHO细胞中的高效表达

来源 :免疫学研究 | 被引量 : 0次 | 上传用户：aliuyangba

【摘 要】

：

构建了人肿瘤坏死因子受体II胞外区、人脂联素球部与人IgG1 Fc的融合基因sTNFRII-gAD-Fc的真核表达载体,在CHO-S细胞中快速高效表达,探索了无血清悬浮流加培养工艺。应用重组

【作 者】

：

王彩虹 柳英 蔡秦真 杨红枚 马丽莎 高基民 

【机 构】

：

温州医科大学检验医学院、生命科学学院浙江省模式生物技术与应用重点实验室,烟台市龙口矿务局中心医院ICU

【出 处】

：

免疫学研究

【发表日期】

：

2015年1期

【关键词】

：

可溶性肿瘤坏死因子受体II-脂联素球部 人免疫球蛋白G1 Fc TNF拮抗剂 “富含GC”表达体系 悬浮流加培养 sTNFRII-gAD IgG1 Fc TNF 

【基金项目】

：

国家新药创新重大专项(No.2009ZX09103-649),浙江省重大科技专项(Nos.2008C14082,2010C13007),卫生部科研基金(No.201231029),浙江省教育厅科学基金(No.Y201016528),浙江省卫生高层次创新人才培养工程,浙江省研究生创新科研项目

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构建了人肿瘤坏死因子受体II胞外区、人脂联素球部与人IgG1 Fc的融合基因sTNFRII-gAD-Fc的真核表达载体,在CHO-S细胞中快速高效表达,探索了无血清悬浮流加培养工艺。应用重组PCR将人IgG1 Fc基因片段与sTNFRII-gAD基因片段融合,构建pMH3-sTNFRII-gAD-Fc表达载体,电转染至CHO-S细胞,挑选G418抗性的高表达单克隆,斑点杂交半定量分析和Western blot分析sTNFRII-gAD-Fc的表达,Protein A-Agarose纯化,以及拮抗TNFα的

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