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目的：建立以高效液相色谱法测定眼保Ⅱ号胶囊中大黄酚含量的方法。方法：色谱柱为Agilent C18（150mm×4.6mm,5μm）,流动相为无水乙醇-0.1%磷酸水溶液（87∶13）,流速为1.0mL·min^-1,检测波长为254nm。结果：大黄酚进样量在0.0426～0.3408μg范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系（r=0.9999）;平均回收率为99.39%,RSD=1.74%（n=6）。结论：本方法简便、准确、灵敏、重复性好,可用于眼保Ⅱ号胶囊的质量控制。