论文部分内容阅读
目的
观察敲低ABCB5基因对食管癌化疗敏感性的影响。
方法构建ABCB5短发卡RNA(shRNA)慢病毒载体，包装空病毒和ABCB5 shRNA慢病毒，感染食管癌EC109细胞，筛选出空载细胞株(对照组)和ABCB5 shRNA细胞株(ABCB5 KD1组和ABCB5 KD2组)。采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测两株敲低稳定细胞株基因沉默效果；采用Western blot法检测ABCB5蛋白表达；采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞的对化疗药物顺铂的敏感性；建立裸鼠食管癌模型，检测敲低ABCB5基因前后EC109细胞体内成瘤能力及顺铂对移植肿瘤的抑制作用。
结果与对照组比较，ABCB5 KD1组和ABCB5 KD2组食管癌细胞ABCB5 mRNA水平显著下调，差异有统计学意义(t＝2.945，P＝0.000；t＝3.198，P＝0.000)。与对照组ABCB5蛋白水平比较，ABCB5 KD1组和ABCB5 KD2组食管癌细胞ABCB5 mRNA水平显著下调，差异有统计学意义(t＝3.091，P＝0.000；t＝3.598，P＝0.000)。与对照组细胞比较，顺铂对食管癌细胞ABCB5敲低稳定细胞株具有较高的杀伤性，差异有统计学意义(F＝3.124，P＝0.010；F＝3.593，P＝0.009)。ABCB5基因敲低食管癌细胞移植后肿瘤生长缓慢，且应用顺铂治疗后，对肿瘤的抑制作用更加显著。
结论敲低ABCB5基因能够特异性沉默ABCB5 mRNA和蛋白水平的表达，显著增强食管癌对顺铂的敏感性。