芦荟大黄素对胃癌SGC-7901细胞株钙联蛋白/钙网蛋白循环及内质网应激凋亡的影响

来源 :中国临床研究 | 被引量 : 0次 | 上传用户:spaceturtle
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目的探讨芦荟大黄素对胃癌SGC-7901细胞钙联蛋白(Calnexin)/钙网蛋白(Calreticulin)循环及内质网应激(ERS)所致凋亡的影响。方法将胃癌SGC-7901细胞分为对照组(灭活胎牛血清的MEM培养基培养)、低剂量组(SGC-7901细胞+10μmol/L芦荟大黄素培养30 min)、中剂量组(SGC-7901细胞+30μmol/L芦荟大黄素培养30 min)和高剂量组(SGC-7901细胞+50μmol/L芦荟大黄素培养30 min)。细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测各组细胞培养24、48、72 h的细胞增殖率;脱氧核苷酸末端转移酶(Td T)介导的核苷酸(d UTP)缺口末端标记技术(TUNEL)检测各组细胞凋亡情况;实时荧光定量PCR检测各组细胞中Calnexin、Calreticulin及葡萄糖调节蛋白(GRP)78、肌醇需求酶(IRE)1、CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)mRNA的变化;蛋白免疫印迹法检测各组细胞Calnexin、Calreticulin、GRP78、IRE1、CHOP的表达。结果 (1)与对照组相比,低剂量组细胞增殖率、凋亡率未见明显变化(P>0.05),中、高剂量组细胞增殖率降低、凋亡指数升高(P<0.05);(2)与对照组相比,低剂量组细胞Calnexin、Calreticulin mRNA和蛋白表达降低,而GRP78、IRE1、CHOP蛋白及mRNA表达无明显变化(P>0.05),中、高剂量组细胞Calnexin、Calreticulin蛋白及mRNA表达水平降低,GRP78、IRE1、CHOP蛋白及mRNA表达增高(P<0.05)。结论芦荟大黄素可能通过影响SGC-7901细胞Calnexin/Calreticulin循环激活GRP78/IRE1/CHOP信号通路,加重胃癌细胞ERS,引发细胞凋亡,降低细胞增殖率。
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