【摘 要】
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目的表达并纯化重组幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,Hp）肿瘤坏死因子-α诱导蛋白（tumor necrosis factor-α-inducing protein,Tipα）,观察其对胃癌细胞增殖和迁移的影响以及IL-
【机 构】
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永州职业技术学院生物化学教研室; 南华大学衡阳医学院病原生物学研究所;
【基金项目】
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湖南省自然科学基金项目(No.2017JJ5049);湖南省教育厅项目(No.14B185);永州市2015年度第二批指导性科技计划项目((No.2015016));湖南省大学生创新创业训练计划项目(湘教通[2019]219号)
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目的表达并纯化重组幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,Hp）肿瘤坏死因子-α诱导蛋白（tumor necrosis factor-α-inducing protein,Tipα）,观察其对胃癌细胞增殖和迁移的影响以及IL-6/STAT3信号通路在其中的作用。方法采用IPTG诱导表达Tipα重组蛋白并通过Ni2+亲和层析纯化,纯化产物进行SDS-PAGE和Western blot鉴定;使用重组Tipα蛋白刺激胃癌SGC7901细胞,分别采用CCK8、流式细胞术、划痕伤口愈合试验和Transwell试验检测其对细胞增殖、凋亡和迁移的影响。结果可溶性25×103重组Tipα蛋白被成功诱导表达且能被抗His-tag单克隆抗体所识别。与空白对照组相比,Tipα蛋白能够抑制SGC7901细胞凋亡（t=9.53;P<0.05）。与PBS组相比,Tipα组细胞的增殖和迁移能力增加,而IL-6单克隆抗体或STAT3抑制剂SH-4-54预处理能够减弱Tipα诱导的细胞增殖和迁移（CCK8实验,F=103.194,P<0.01;划痕伤口愈合试验,F=15.568,P<0.01;Transwell试验,F=36.017,P<0.01）。结论 Hp Tipα蛋白可促进胃癌细胞增殖和迁移,IL-6/STAT3信号通路在其中发挥重要作用。
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