【摘 要】
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目的 研究西罗莫司对体外培养的皮肤鳞状细胞癌细胞株Colo-16细胞凋亡的影响. 方法 用不同浓度的西罗莫司处理Colo-16细胞,以四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测西罗莫司对Colo-16细胞体外增殖的影响;AnnexinV-FITC和PI双染检测Colo-16细胞凋亡率;Hoechst33258荧光染色法观察凋亡细胞的形态学变化;半定量逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)测定Bcl-2、Bax
【机 构】
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目的 研究西罗莫司对体外培养的皮肤鳞状细胞癌细胞株Colo-16细胞凋亡的影响. 方法 用不同浓度的西罗莫司处理Colo-16细胞,以四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测西罗莫司对Colo-16细胞体外增殖的影响;AnnexinV-FITC和PI双染检测Colo-16细胞凋亡率;Hoechst33258荧光染色法观察凋亡细胞的形态学变化;半定量逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)测定Bcl-2、Bax mRNA的表达. 结果 不同浓度的西罗莫司对Colo-16细胞体外增殖均具有抑制作用,这种抑制作用与西罗莫司的作用时间和剂量呈明显的依赖关系(P<0.05).西罗莫司显著增加Colo-16细胞的早期凋亡,西罗莫司(50,100,150,200 nmol/L)作用48 h后诱导Colo-16细胞的早期凋亡率分别为7.26%±0.26%、8.34%±0.19%、9.86%±0.14%、11.92%±0.15%,与对照组1.53%±0.09%比较,差异有统计学意义(P<0.05),且Colo-16细胞早期凋亡率与西罗莫司浓度呈剂量依赖关系(r=0.955,P=0.000).荧光染色可见细胞核染色质凝聚、边集、核裂解的形态学改变;Bcl-2 mRNA表达显著下调而Bax mRNA的表达显著增强. 结论 西罗莫司在体外能诱导Colo-16细胞凋亡,其发生机制可能与其调节Bel-2、Bax等凋亡调控基因的表达有关。
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